Práctica 2. Banco de diluciones.

En esta práctica nos hemos propuesto a hacer un banco de diluciones seriadas, con azul de metileno como indicador.
Hemos utilizado como factor de dilución 1/10, y tiene que tener 9 ml de sustancia en cada tubo de ensayo.

Los materiales para realizar esta práctica son:

• Pipeta automática y puntas para la pipeta.
• Pipeta graduada (10ml).
• Pipeta graduada de 1ml.
• Tubos de ensayo.
• Vasos de precipitado.
• Indicador: Azul de metileno.
• Gradilla para los tubos de ensayo.
• Papel de filtro.
• Mechero de alcohol.
• Tapones para los tubos.
• Rotulador.
• Agitador.
• Diluyente: Agua destilada.
• Auxiliar de pipeteado: pera y de cremallera.
• Varilla agitadora.

Desarrollo: Realizamos la práctica con ambas pipetas pero vamos a explicar el desarrollo del ejercicio utilizando la pipeta automática.

1. Se esteriliza el material a usar.
2. Se enciende el mechero de alcohol y se tiene cerca de los tubos.
3. Echamos agua destilada en dos vasos de precipitado, echando unas gotas de azul de metileno en uno de ello y mezclándolo con una varilla agitadora.
4. Con la pipeta graduada de 10 ml, cogemos del vaso de precipitado 9 ml y vamos llenando cada tubo de ensayo con 9 ml.
5. Con la pipeta automática, seleccionamos 1ml y cogemos del vaso de agua con azul de metileno, vertiéndolo en el primer tubo de ensayo, y lo agitamos con el agitador.
6. Hacemos lo mismo pero cogiendo 1ml del tubo 1 y lo echamos en el tubo 2 y agitamos.
7. Continuamos con el 3º tubo, cogiendo 1ml del tubo 2 y vertiéndolo en él, a continuación agitamos el tubo.
8. Así hasta haber realizado el ejercicio con los 5 tubos.
9. Se descontamina el material.

Hay que tener en cuenta una serie de precauciones en el ejercicio del banco de diluciones seriadas:

• Antes y despúes de echar el azul de metileno en los tubos hay que pasarlo por el mechero.
• En cada traspaso de líquido de tubo a tubo cambiarle la punta de la pipeta si es automática o cambiar de pipeta si es graduada.
• Antes y después del ejercicio hay que esterilizar y descontaminar el material.
• El agitador estaría en 1400 revoluciones.
• Siempre agitar los tubos con el tapón puesto para prevenir.