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jueves, 31 de enero de 2019

Práctica 21: Levadura.

Para realizar algo distinto, cogimos levadura fresca y nos dirigimos a su observación.

Para ello, utilizamos los siguientes materiales:

  • Levadura fresca.
  • Azúcar.
  • Microscopio.
  • Portaobjetos.
  • Asa de siembra.
  • Vaso de precipitado.
  • Agua destilada.






Comenzamos por:
  • Cogimos un trozo de levadura y lo echamos en un vaso de precipitado con un poco de agua destilada y azúcar, para ver su cambio.
  • Lo homogeneizamos, y cogemos una muestra con el asa de siembra.
  • Hacemos un frotis en el porta, y nos dirigimos a su observación.
 


Práctica 20: Siembra de caldo

Nos confundimos con el caldo bilis verde brillante el día anterior, ya que pesamos que era agar y no solidificó.
Entonces aprovechamos para echarlo en tubos de ensayo, y mezclarlo con una muestra de un cultivo de enterobacterias que había reservado.

Los materiales usados:

  • Caldo bilis verde brillante.
  • Tubos de ensayo.
  • Gradillas.
  • Embudo.
  • Asa de siembra.
  • Cultivo de enterobacterias.
  • Tapones para los tubos de ensayo.

 


miércoles, 30 de enero de 2019

Práctica 19: Varias prácticas.

Se realizaron 3 prácticas diferentes que resultaron bastante interesante para coger soltura y aprender a usar el estomacher.
La primera técnica que se realizó fue: Preparacion de diluciones decimales y manejo y uso del estomacher.
Este ejercició se llevó a cabo con la cáscara de un huevo y con un yogur con trozos de nuez.
El material utilizado fue:

  • Estomacher.
  • Bolsa de estomacher.
  • Huevo.
  • Yogur.
  • Gradilla.
  • Pipeta y pera.
  • Tubos de ensayo.
  • Agua de peptona.
  • Bol de porcelana.
  • Tanita.

Y los pasos que se siguieron fueron:
  1. Pesar 10g de la muestra tanto de yogur como de cáscara del huevo, la cáscara se machaca para evitar la rotura de la bolsa. 
  2. Se mete en la bolsa con 90ml de agua de peptona y en el estomacher, y se pone en funcionamiento.
  3. Una vez hecha la mezcla homogénea, se preparan los tubos de ensayos en la gradilla.
  4. Con la pipeta coger 9ml de agua de peptona y echarla en los tubos.
  5. Se coge 1 ml del primer líquido de la muestra y se echa en el primer tubo, de ese 1 ml y al segundo tubo y así hasta el último.







Con el primer líquido de la muestra también realizamos un frotis en el portaobjetos para su observación en el microscopio.

-Realización de 3 medios de cultivo diferentes:
  • Agar Estándar: 11.75g/0.5L agua destilada.
  • Agar MacCconkey: 25.75g/0.5L.
  • Caldo bilis verde brillante: 20g/0.5L.



 

Realizamos el método de inundación con una muestra del huevo con el agar estándar y el caldo verde bilis: este método consiste en echar 1 ml (huevo) de los tubos de ensayo, encima del cultivo ya bien espeso en la placa de petry, repartirlo y quitar el exceso con una ppipeta pasterur.
Una vez retirado el exceso meter en el horno de cultivo.
Realizamos el método Barry que es totalmente lo contrario, es decir, echamos 1 ml (yogur) de los tubos de ensayo, en la placa petry y encima el medio de cultivo aún líquido.
Una vez finalizado meter en el horno de cultivo.

        


lunes, 14 de enero de 2019

Práctica 18: Tinción de GRAM-.

Nos hicimos con un cultivo de Proteus Gram- para realizar una tinción de Gram, y así poder observar mejor las bacterias.
Materiales que utilizamos:

  • Microscopio.
  • Tintes.
  • Pinzas.
  • Portaobjetos.
  • Mechero.
  • Aceite de inmersión.
  • Asa de siembra.
  • Siembra de Proteus.
  • Paralelas.














Los pasos fueron similares a la práctica del otro día salvo que esta vez cogimos la muestra de un cultivo ya hecho, y cambiamos el orden de lavado con agua destilada, así pues los realizados fueron:
  • Cogimos la muestra del cultivo Proteus con el asa de siembra esterilizada.
  • En un porta con una gotita de agua destilada, restregamos la muestra cogida en el asa para hacer una mezcla homogénea. Estirilizamos el asa.
             

  • Cogemos el porta con las pinzas y lo pasamos por el mechero hasta que quede bien sellada la muestra, pero sin quemarla.
  • Lo llevamos a las paralelas para teñir:
  • Echamos el tinte Violeta, esperamos 1 minuto, y lo lavamos con agua destilada.
  • Echamos el lugol, y esperamos 1 minuto también.
  • Lo lavamos con agua destilada y echamos el alcohol en el que esperamos 3 segundos.
  • Por último echamos la Safranina y dejamos que actúe 3 minutos.
  • Se vuelve a lavar con agua destilada, y se deja escurrir y secar.







  • Por último llegó la hora de observar la muestra:


 









sábado, 12 de enero de 2019

Práctica17: Tinción de GRAM.

Nos preparamos para realizar una tinción de GRAM con una muestra de la boca de una compañera.
El material que hemos utilizado es:

  • Asa de siembra de plástico para muestra de la boca.
  • Papel de filtro.
  • Mechero.
  • Microscopio.
  • Portaobjetos.
  • Pinzas de madera.
  • Hilo de platino.
  • Pipeta Pasteur.
  • Tintes.
  • Aceite de inmersión.






Los pasos que se siguieron fueron los siguientes:

  • Cogemos una muestra de la boca con el asa de siembra de plástico.
  • Con la pipeta Pasteur cogemos una gota de agua destilada y la echamos en el portaobjetos.
  • Con el asa de siembra de la muestra se hace una extensión en el portaobjetos mezclándolo bien con el agua destilada.
  • Con ayuda de las pinzas lo pasamos por el mechero para que se adhiera bien la muestra al porta.
  • Se lleva la muestra a las paralelas donde se va a teñir:
  • Primero se le echa el tinte Violeta, y esperamos 1minuto.
  • Después se le echa el Lugol y dejamos otro minuto para que actúe.
  • A continuación se lava con agua destilada.
  • Luego, se decolora con alcohol durante 3 segundos.
  • Y por último se le echa la Safranina y dejamos que actúe durante 3 minutos.
  • Se lava con agua destilada con cuidado.
  • Y se deja secan al aire o pasandolo por el mecher.
  • Ahora llega el momento de su observación.
    

                

 Observación: Comenzamos con el objetivo más pequeño y poco a poco vamos aumentando para una mejor visualización con más aumento, hasta llegar al x100 que hacemos uso del aceite de inmersión.
Viendo los resultados del último objetivo se puede observar pequeños puntos rojizos, eso quiere decir que estamos ante un GRAM+.
Objetivo x4
Objetivo x10
Objetivo x40
Objetivo x60
Objetivo x100